DB52∕T1405-2019 白水生姜脱毒试管苗及原原种生产技术规程(贵州省) 12页

ICS65.020.20B36DB52贵州省地方标准DB52/T1405—2019白水生姜脱毒试管苗及原原种生产技术规程TechniqueRegulationsforInvitroVirus-freePlantletandStockPlantProductionof‘Baishui’Ginger2019-04-30发布2019-11-01实施贵州省市场监督管理局发布\n\nDB52/T1405—2019目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12规范性引用文件....................................................................13术语和定义........................................................................14脱毒苗培育........................................................................15脱毒原原种培育....................................................................36质量要求..........................................................................37收获与贮藏........................................................................4I\n\nDB52/T1405—2019前言本标准按照GB/T1.1—2009《标准化工作导则第一部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。本标准由安顺市农业科学院提出。本标准由贵州省农业委员会归口。本标准起草单位：安顺市农业科学院。本标准主要起草人：吴家丽、牛力立、李用奇、冷云星、赵佐敏、宋生懿、陈红艳、敖艳飞、钟思玲、严云刚、张领、宋贞富、安星、郭海燕、金超、樊祖立、肖祎。II\n\nDB52/T1405—2019白水生姜脱毒试管苗及原原种生产技术规程1范围本标准规定了白水生姜脱毒试管苗培育、脱毒原原种培育、收获与贮藏。本标准适用于白水生姜脱毒试管苗及原原种生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB5084农田灌溉水质标准GB15618土壤环境质量农用地土壤污染风险管控标准（试行）NY/T404脱毒生姜种姜苗病毒检测技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1脱毒苗Invitrovirus-freeplantlet应用茎尖组织培养技术获得、经检测确认不带烟草花叶病毒（TMV）、黄瓜花叶病毒（CMV）的试管苗。3.2原原种（G1）Stockcultivar用脱毒苗在防虫网室等隔离条件下生产出的符合质量标准的种姜。4脱毒苗培育4.1茎尖分生组织热处理精选块大肉厚、皮色黄亮光滑、芽眼饱满、无病虫危害和机械损伤的健壮姜块，在自来水下洗净泥土，用0.1％的高锰酸钾处理15min，再用0.5%浓度的多菌灵（80%可湿性粉剂）浸泡2h后捞出晾干，置于高温灭菌后的湿润珍珠岩中28℃催芽，空气相对湿度在80%～85%。姜芽萌动3mm左右后，置于40℃～45℃（8h/d）温度下热处理30d。1\nDB52/T1405—20194.2脱毒苗离体诱导4.2.1外植体采集与灭菌于培养箱中切取热处理后约2cm长的幼芽，在自来水下冲洗干净后晾干，在超净工作台上用75%酒精灭菌30s，再用10%次氯酸钠（NaClO）对幼芽处理15min，无菌水冲洗5次，无菌滤纸吸干水分备用。4.2.2外植体接种及植株再生将灭菌后的幼芽于体视显微镜下剥取0.1mm～0.3mm茎尖分生组织，接种于MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA培养基上，诱导再生植株。4.2.3再生植株病毒检测对获得的再生植株，经有资质的病毒检测单位进行烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒检测，确认无毒后再继代扩繁及生根培养。4.3脱毒苗继代扩繁将检测无病毒、长势好的壮苗接种于MS+2.5mg/L～3.0mg/L6-BA+0.03mg/LNAA培养基上增殖培养。4.4脱毒试管苗生根培养选取株高2cm～3cm、长势壮的再生脱毒植株，接种于MS+0.1mg/LNAA+0.5mg/LIBA培养基上诱导生根。4.5培养条件以上培养条件为：培养室温度25±1℃，光照强度2000LX，光照时间12h/d～16h/d。4.6网室要求4.6.1环境要求4.6.1.1应选择周边500m内无生姜种植、具有无检疫性病害的地块，建设网室进行原原种（G1）种姜生产。4.6.1.2应建设在气候适宜、天然隔离条件好的区域。4.6.1.3周围无污染源，没有易引诱蚜虫的作物。4.6.1.4所处地势有利于灌溉和排水。土壤质量应符合GB15618要求；水源充足，能满足生产灌溉要求，水质符合GB5084要求。4.6.2基础设施要求4.6.2.1网室要求具有通风、良好的光照条件，有防雨和防虫设施。网室的通风口要装有孔径0.247mm（60目）的防虫网纱。4.6.2.2网室进门处修建一个缓冲间，应随时消毒灭菌。缓冲间应设置消毒设施，可用生石灰或其他消毒剂消毒。2\nDB52/T1405—20194.6.3消毒要求4.6.3.1网室及其内部设施应定期消毒。可用硫磺熏蒸、50%多菌灵可湿性粉剂800倍液喷洒或0.1%高锰酸钾消毒。防虫网室可用50%多菌灵可湿性粉剂800倍液喷洒。4.6.3.2应对所用工具（剪刀、刀片、培养皿等）高温灭菌或0.5%高锰酸钾浸泡。4.6.3.3工作人员应穿洁净的工作服、用肥皂洗手，工作场所禁止吸烟。5脱毒原原种培育5.1基质配制及灭菌根据条件单独应用蛭石或珍珠岩或1份松针土+1份疏松营养土作为基质。于移栽前一个月用1%甲醛对有防虫网的塑料大棚和基质熏蒸消毒。在苗床上铺一层20cm左右的基质。浇透水，待含水量达到60%～70%时，准备栽苗。5.2炼苗移栽前一周将具备2cm长、10条根、生长健壮、株高4cm以上的脱毒苗连同培养瓶移出培养室，于隔离条件下，温度25℃左右的散射光下炼苗5d～7d。5.3移栽3月下旬至4月下旬地温回升后，在网室塑料大棚，选取炼苗后符合标准的脱毒苗，用消毒镊子轻轻夹出，洗去根部培养基，按12cm～15cm×20cm的株行距移栽至大棚中，移栽时使根系与基质充分接触，及时浇足定根水，加盖小拱棚和遮阳网保温、保湿和遮荫。5.4幼苗管理5.4.1光照管理此期遇晴天强光天气及时加盖遮阳网，避免中午强光直射；阴天中午应及时揭开网室和拱棚膜两头进行通风透气，至试管苗移栽后30d左右逐步撤除遮阳网。5.4.2肥水管理缓苗后，幼苗长出新根，保持基质湿度70%～80%，根据幼苗生长势追施撒可富水溶肥4次～5次或喷施营养液。不定期浇水，结合中耕除草，培土2次～3次。5.4.3温湿度管理温、湿度应根据不同生育阶段的需要采取覆盖遮阳网、保温、通风等措施进行调节。5.4.4病虫害防控生产过程中应全程进行病虫草害防治，及时清除网室大棚内外杂草，缓苗后7d～10d喷一次杀虫杀菌剂。6质量要求按NY/T404规定方法执行。3\nDB52/T1405—20197收获与贮藏7.1收获前15d内停止浇水。7.2霜降前或霜降后10d左右，地上部茎叶开始枯黄时选晴天收获。7.3收获后将茎叶掰去，运回室内或地窖贮藏后熟。各地可根据当地传统经验采用适宜的贮藏方法。贮藏时要轻拿轻放，以免碰伤，影响质量。适宜贮藏温度为11℃～13℃，相对湿度90%左右。_________________________________4\n\nDB52/T1405-2019